人Cu，Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性

• 作 者: 迟春萍 隋红 李雨桐 薛向光 王志武 牛灵 刘畅 王艳芳 吴
• 机 构: 长春生物制品研究所,吉林农业大学生命科学学院,吉林大学公共卫生学院
• 出 处: 中国生物制品学杂志
• 发表日期: 2008年5期
• 关键词: 人Cu Zn-SOD基因 真核表达 毕赤酵母 稳定性 Human Cu Zn-SOD gene Eukaryotic expression Pichia
• 基金项目: 吉林省科技厅资助项目（20070924-02）

目的构建人Cu，Zn-SOD基因的真核表达载体，转化毕赤酵母，并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性，合成人Cu，Zn-SOD基因，克隆至真核表达载体pPICgk中，转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达，SDS-PAGE和Westernblot鉴定表达产物。优化表达条件，并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Westernblot检测，表达的目的蛋白相对分子质量为18000左右；最佳表达条件为pH6．0，甲醇浓度1．5％，持续培养96h；目的蛋白占分泌蛋白总量的27％，最高表达量为9