鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

• 作 者: 刘胜旺 潘蔚绮 孔宪刚 李广兴 夏春
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,东北农业大学,中国农业大学
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2003年5期
• 关键词: 鸡白细胞介素-18基因 原核表达 多克隆抗血清 重组蛋白 制备 细胞因子 prokaryotic expression chicken IL18 fusion
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划(863计划)

将编码鸡白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达栽体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定.然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37 C诱导培养.表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,目的蛋白表达量占菌体蛋白的30%.SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达的鸡IL-18融合蛋白相对分子质量约为23 000.包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化.用所获得的重组鸡IL-18融合蛋白及其纯化