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目的建立高效液相色谱法测定血浆中氨甲喋呤浓度的方法。方法以乙腈∶0.02mol/L磷酸水溶液(10∶90)为流动相,监测波长为302nm。结果在0~35.2μmol/L范围内呈良好线性关系,r=0.99995。日内及日间测得的RSD分别为0.62%,3.03%,平均回收率为99.6%。血清中最低检测浓度为10ng/ml。结论本法具有快速、准确,操作简便,流动相成本低等优点。