负载肿瘤抗原DC与CIK共培养对裸鼠肺腺癌移植瘤抑制作用观察

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目的探讨负载肿瘤抗原的树突状细胞(dendritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)共培养后在体内的杀伤活性及分子机制。方法常规方法分离2011-05-06-2013-07-08南京军区福州总医院健康成年志愿者外周血单个核细胞,体外分别诱导培养为DC和CIK细胞;流式细胞仪测定负载抗原的DC与CIK的表型变化;建立人肺腺癌A549裸鼠(24只)移植瘤模型,应用随机数字表按完全随机分组原则分为PBS组、CIK组和AgDC-CIK组。治疗30d后摘取瘤块,称质量并计算抑瘤率;HE染色观察瘤体组织细胞的形态学变化,免疫组化法检测瘤体组织中VEGF、MMP-9和Bcl-2表达情况。结果负载抗原后DC细胞表面标志CD83+为(45.812±6.110)%,CD86+为(78.341±6.839)%,HLA-DR+为(75.103±5.913)%,与负载前比较均显著升高,t值分别为5.384、7.902和10.132,P值分别为0.009、0.003和<0.001;与CIK共培养CD3+CD8+为(55.417±8.428)%,CD3+CD56+为(39.823±7.215)%,均有显著增加,t值分别为6.185和9.904,P值分别为0.008和0.001;Ag-DC-CIK组能明显下调移植瘤VEGF、MMP-9和Bcl-2等蛋白的表达,t值分别为7.630、11.751和9.624,P值分别为0.002、<0.001和<0.001;且Ag-DC-CIK组对VEGF和Bcl-2表达的抑制作用均强于单纯CIK组,t值分别为5.832和6.214,P值分别为0.009和<0.001;在MMP-9的表达上与单纯CIK组差异无统计学意义,t=1.022,P=0.865。结论负载肿瘤抗原的DC与CIK共培养后可有效抑制VEGF、MMP-9和Bcl-2的表达,抑制裸鼠肺腺癌移植瘤的生长。
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