核因子kB诱捕脱氧寡核苷酸对异位内膜基质细胞RANTES含量及趋化能力的影响

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目的 探讨核因子(NF)kB诱捕脱氧寡核苷酸(ODN)对子宫内膜异位症(内异症)患者异位内膜基质细胞中正常T淋巴细胞表达和分泌调节活化因子(RANTES)的含量,及其对单核细胞趋化能力的影响.方法 分离、培养11例内异症患者的卵巢异位内膜基质细胞.实验分为3组,即刺激组[用10μg/L白细胞介素(IL)1β刺激培养]、转染后刺激组(NF-kB诱捕ODN转染异位内膜基质细胞后,用10μg/L IL-1β刺激培养)和空白对照组.各组刺激培养4、8、12、24、36 h后分别取上清液,采用酶联免疫吸附试验检测RANTES蛋白的含量;采用Boyden小室趋化实验检测上清液中RANTES对单核细胞的趋化能力.另对刺激组培养24 h后,在上清液中加入不同浓度(0.5、1、2、4、8 mg/L)的抗RANTES抗体,采用Boyden小室趋化实验检测上清液中RANTES对单核细胞的趋化活性.结果 (1)培养8、12、24、36 h后RANTES蛋白的含量,刺激组分别为(58±10)、(150±35)、(360±46)、(586±42)ng/L,均高于空白对照组[分别为(32±6)、(32±7)、(31±6)、(33±8)ng/L],两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);培养12、24、36 h后RANTES蛋白的含量,转染后刺激组分别为(86±16)、(128±28)、(183±32)ng/L,均低于刺激组,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)刺激培养12、24、36 h后RANTES对单核细胞的趋化指数,转染后刺激组分别为10.3±0.9、13.7±1.1、18.6±1.2,均低于刺激组(分别为15.3±1.2、24.3±1.4、32.4±1.6),两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)刺激组培养24 h后加入抗RANTES抗体浓度为0.5、1、2、4、8 mg/L时,单核细胞的趋化抑制率分别为5%、23%、40%、62%和61%.结论 NF-kB诱捕ODN可抑制IL-1β所诱导的异位内膜基质细胞中RANTES的含量,并降低其对单核细胞的趋化能力.在内异症病灶中,RANTES是单核.巨噬细胞的主要趋化因子.
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