菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作 者: 胡加谊 李向宏 罗志文 范鸿雁 张治礼 刘志昕 何凡
• 机 构: 海南省农业科学院热带果树研究所·,农业部海口热带果树科学观测实验站,海南省农垦科学院,中国热带农业科学院热带生物技术研究所
• 出 处: 果树学报
• 发表日期: 2015年1期
• 关键词: 菠萝凋萎相关病毒-3 实时荧光定量PCR TAQMAN探针 检测 Pineapple mealybug wilt associated virus-3qPCRT

【目的】建立菠萝凋萎相关病毒-3实时荧光定量PCR检测方法。【方法】根据PMWa V-3外壳蛋白基因的保守区域设计特异性引物和探针,通过优化PMWa V-3实时荧光定量PCR检测体系,构建以重组质粒为标准品的标准曲线,建立起PMWa V-3实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能特异性地检测PMWa V-3,且灵敏度是普通RTPCR的10倍;该方法重复性良好,组间和组内变异系数均小于1.73。【结论】建立的实时荧光定量PCR方法是一种快速、简便、可信度高的PMWa V-3定量检测方法。