WDR5真核表达载体的构建及其在LNCaP细胞中的稳定表达

• 作 者: 段君君 方峰 张小玉 王江 贾霄 何颖红
• 机 构: 云南省高校细胞生物学重点实验室,大理大学基础医学院
• 出 处: 昆明医科大学学报
• 发表日期: 2017年6期
• 关键词: WDR5 真核表达 G418抗性 脂质体转染 WDR5 Eukaryotic expression G418 resistance Liposome tansf
• 基金项目: [基金项目]国家自然科学基金资助项目(31360288)

目的构建人源WDR5全长结构基因真核表达载体，建立稳定表达WDR5的LNCaP细胞株．方法PCR扩增WDR5基因，将WDR5插入pCI-neo载体中，酶切及测序鉴定重组质粒．利用脂质体转染法将重组质粒转染LNCaP细胞，RealTime-PCR检测转染细胞WDR5的mRNA表达水平．结果经酶切及测序证实真核表达载体pCI-neo-WDR5构建正确．重组质粒转染到LNCaP细胞后，用G418筛选获得稳定表达的细胞株，RealTime-PCR方法检测到WDR5基因在转录水平的表达．结论PCI-neo-WDR5