论文部分内容阅读
根据乙肝病毒核心抗原（HBcAg）的MHC-Ⅰ类分子结合关键序列合成抗原性多肽2段（PepⅠ aa：18～27及PepⅡ aa：141～151），分别与转铁蛋白（Tf）、抗CD3的单克隆抗体（CD3 McAb）和IL-2联合体外诱导乙肝病毒抗原特异性细胞毒T细胞（HBV-CTLs），动态观察其增殖状态和细胞毒活性。结果显示，HBV-CTLs对转染HBV DNA的肝癌细胞（2.2.15细胞）在第7天出现特异性细胞毒活性，第14天达高峰，分别为67%（PepⅠ+Tf+CD3 McAb+IL-2）、55%（PepⅡ+Tf+CD3 McAb+IL-2），明显高于LAK细胞组（20%）（IL-2）及CD3-AK细胞组（34%）（IL-2+CD3 McAb+Tf），P<0.05。而HBV-CTLs对无HBV DNA转染的肝癌细胞（HepG2细胞）非特异性杀伤率，与LAK细胞及CD3-AK细胞相比，无显著性差异（P>0.05）。HBV-CTLs体外培养3天后开始增殖，21天达高峰，扩增倍数比LAK细胞高10倍。细胞培养上清一氧化氮（NO）含量动态分析显示，HBV-CTLs细胞培养上清NO含量与细胞毒活性存在正相关关系（R=0.8，P<0.05），提示NO可能是HBV-CTLs效应分子之一。细胞表型分析显示，HBV-CTLs是以CD8+为主的异质细胞群。