【摘 要】
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目的建立检测酒精依赖标记物糖缺陷转铁蛋白(CDT)的高效液相紫外(HPLC-UV)色谱分析方法。方法抽取人体血样3 mL,分离准备血清,加碳酸氢钠(500 mmol/L)和氯化铁(10 mmol/L),使
【机 构】
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新疆医科大学基础医学院法医教研室; 乌鲁木齐市第四人民医院戒酒科;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81360466)
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目的建立检测酒精依赖标记物糖缺陷转铁蛋白(CDT)的高效液相紫外(HPLC-UV)色谱分析方法。方法抽取人体血样3 mL,分离准备血清,加碳酸氢钠(500 mmol/L)和氯化铁(10 mmol/L),使血清中的铁离子饱和;再用硫酸葡聚糖(100 g/L)和氯化钙(1 mmol/L)沉淀血清中的脂蛋白,该样品放置在4℃冰箱中30~60 min,取出样品2 000 r/min离心5 min,将离心后的样品上清液置于冻存管中,用超纯水稀释10倍,将稀释样品经超声波排除气泡,用0.45 mm微孔滤膜过滤,送样品用高效液相色谱仪—紫外检测器进行测定。采用质控样品和空白样品对照法,计算糖缺陷转铁蛋白(CDT)在所有的唾液酸转铁蛋白中的百分含量。结果 HPLC-UV检测CDT灵敏度为95.7%,特异性为92.3%,并且与金标准毛细管电泳法(CZE)间具有良好的线性关系,回归方程为Y=0.896 8X+0.691 3,R~2=0.935 1。结论 HPLC-UV检测CDT有较高的灵敏度和特异性,对于法医司法和临床酒精依赖的诊断和治疗监控有较高的应用价值。
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