【摘 要】
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目的 探讨红细胞生成素(EPO)对单核细胞hepcidin的影响及其分子学机制.方法 采用实时定量PCR和Western blot方法检测hepcidin及信号分子C/EBPα、Smad1/5/8、磷酸化(p)-Smad1
【机 构】
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中国医学科学院、北京协和医学院北京协和医院,中国医学科学院、北京协和医学院基础医学院
【基金项目】
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中国医师协会血液科医师分会临床医学科研专项资金;
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目的 探讨红细胞生成素(EPO)对单核细胞hepcidin的影响及其分子学机制.方法 采用实时定量PCR和Western blot方法检测hepcidin及信号分子C/EBPα、Smad1/5/8、磷酸化(p)-Smad1/5/8和p-STAT3的表达水平.采用IL-6或脂多糖(LPS)刺激人单核细胞系THP-1细胞,观察EPO对THP-1细胞hepcidin及信号分子表达的影响.加入EPO受体(EPOR)的抗体,观察其对EPO的拮抗作用以及对信号分子的影响.结果 EPO能抑制由20 ng/ml IL-6或1 μg/ml LPS诱导的THP1单核细胞hepcidin mRNA表达,作用呈时间和浓度限制性,EPO 2 U/ml(降低56%或64%)、作用6 h(降低53%或66%)抑制作用最明显.在20 ng/ml IL-6诱导作用下,EPO还可抑制hepcidin蛋白表达,EPO 2 U/ml作用6 h hepcidin蛋白表达明显降低.同时信号分子C/EBPα、p-Smad1/5/8和p-STAT3表达也受抑制,EPOR抗体能够拮抗EPO对hepcidin以及上述信号分子的抑制作用.结论 EPO可以抑制IL-6或LPS诱导的单核细胞hepcidin表达;在体外,EPO可能是通过下调C/EBPα、p-Smad1/5/8和p-STAT3进而抑制单核细胞hepcidin表达.
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