建立FQ-PCR定量体系检测新型隐球菌CAP10 mRNA

来源 :福建医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lx84015092
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目的建立荧光定量PCR(FQ-PCR)技术定量检测新型隐球菌(CN)的荚膜相关蛋白10(CAP10)基因mRNA,为新型隐球菌的诊断、预后及疗效判断提供依据。方法用逆转录PCR的方法从CN标准株(ATCC34874)中扩增得到CAP10,构建重组质粒标准品pGEMT—Easy-CAP10,以倍比稀释的标准品制备标准血线。设计引物和探针,建立FQ-PCR反应体系并对其重复性、特异性和线性范围进行评价。结果成功构建了重组质粒标准品pGEMT—Easy—CAP10,并用倍比稀释的标准品制备了标准曲线Y=-3.1
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