【摘 要】
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目的探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统体外靶向杀伤肝癌细胞效应。方法构建人AFP增强子驱动的pAFP-CDNA3.1-TK自杀基因真核表达
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目的探讨人AFP增强子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)自杀基因系统体外靶向杀伤肝癌细胞效应。方法构建人AFP增强子驱动的pAFP-CDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒,脂质体转染肝癌细胞,检测TK mRNA和蛋白表达,MTT法检测GCV对肝癌细胞的杀伤作用。结果成功构建pAFP-CDNA3.1-TK自杀基因真核表达质粒,在AFP阳性HepG2细胞中检测到TK mRNA和蛋白表达,添加GCV可特异性地杀伤HepG2细胞,而AFP阴性的SMMC7721细胞生长不受影响。结论 AFP增强子驱动的TK/GCV自杀基因系统可以靶向杀伤AFP阳性肝癌细胞。
Objective To investigate the effect of human AFP enhancer on HSV-TK / GCV suicide gene system targeting and killing hepatocellular carcinoma cells in vitro. Methods The eukaryotic expression plasmid pAFP-CDNA3.1-TK suicide gene driven by human AFP enhancer was constructed and transfected into hepatocellular carcinoma cells. The expression of TK mRNA and protein was detected by MTT assay. The killing effect of GCV on hepatoma cells was detected by MTT assay. Results The eukaryotic expression plasmid of pAFP-CDNA3.1-TK suicide gene was successfully constructed. The expression of TK mRNA and protein was detected in AFP positive HepG2 cells. The addition of GCV specifically killed HepG2 cells, whereas the AFP negative SMMC7721 cells did not grow influences. Conclusion The AFP enhancer-driven TK / GCV suicide gene system can target AFP positive hepatoma cells.
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