【摘 要】
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为了提供有效的抗原蛋白用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的临床诊断及防控研究,试验对ASFV SY-18株的多基因家族(MGF360)中的9L～ 14L共计6条基因序列进行E.
【机 构】
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国家兽用药品工程技术研究中心,河南洛阳471000
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为了提供有效的抗原蛋白用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的临床诊断及防控研究,试验对ASFV SY-18株的多基因家族(MGF360)中的9L～ 14L共计6条基因序列进行E.coli密码子优化,合成优化后的基因序列并克隆至pET28a质粒上,然后转化至E．coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导目的蛋白表达,通过镍柱亲和层析纯化目的蛋白.结果表明:MGF360蛋白的原核表达质粒构建正确,无点突变.MGF360蛋白的原核表达质粒成功转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经诱导表达的6个基因均能获得可溶性表达,出现分子质量约为40 ku的蛋白条带,与预测大小一致.经Western-blot检测,能与HRP标记的His标签单克隆抗体结合.说明试验成功构建了ASFV MGF360蛋白的原核表达质粒,并表达纯化出目的蛋白.
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