论文部分内容阅读
目的:利用细菌内同源重组法构建含血管内皮生长因子(VEGF)165基因的重组腺病毒,并观察其在内皮祖细胞(EPCs)中的表达,为进一步研究其在慢性肾脏病中的作用奠定基础。方法:用限制性内切酶XbaⅠ+HindⅢ从质粒载体中切出VEGFl65基因片段,与KpnⅠ+HindⅢ双酶切的pAdTrack-CMV形成转移质粒pAdTrack-CMV-VEGFl65,PmeI酶切线性化后与腺病毒基因组质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,由人胚肾293细胞包装成Ad-VEGFl65,PCR和westem