【摘 要】
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目的:探讨趋化因子CCL3对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)外泌体分泌的调控作用。方法:采用CCK-8法和活细胞计数检测h BMSCs的增殖活
【机 构】
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南方医科大学,广州中医药大学,暨南大学基础医学院,广州军区广州总医院,广东省赛莱拉干细胞研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81570107);广东省自然科学基金资助项目(No.2014A030311006)
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目的:探讨趋化因子CCL3对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs)外泌体分泌的调控作用。方法:采用CCK-8法和活细胞计数检测h BMSCs的增殖活性;采用电镜观察、流式细胞术和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)对外泌体进行定性和定量分析。结果:CCK-8检测显示,CCL3组细胞的存活率大于对照组(P<0.05);活细胞计数结果显示,CCL3组细胞数明显多于对照组(P<0.05),呈浓度依赖性;流式细胞术分析结果显示,h BMSCs表达CCR1、CCR5和CCR9 3种CCL3特异性受体;CCL3作用h BMSCs后,CCR9荧光强度明显增强,CCR5和CCR1荧光强度无显著差异。NTA结果显示,与对照组相比,CCL3组外泌体分泌量明显减小(P<0.05),同时微囊泡(粒径大于100 nm)数明显增多(P<0.05);外泌体流式细胞术分析结果提示,与对照组相比,CCL3组的CD9+外泌体阳性率显著下降(P<0.01)。结论:CCL3促进h BMSCs增殖并抑制其外泌体的分泌,同时影响h BMSCs外泌体的粒径分布,无效的微囊泡增多。
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