人细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）基因克隆和原核表达

• 作 者: 郑永晨 曹岩 毓明涛
• 机 构: 吉林大学第二医院中心实验室
• 出 处: 中国老年学杂志
• 发表日期: 2005年3期
• 关键词: 细胞周期蛋白依赖性激酶 基因克隆 原核表达 Cyclin dependent kinase(CDK) Gene clone Prokaryotic expre

目的从人胃癌组织中克隆出人CDK2基因和原核表达CDK2蛋白.方法从胃癌组织中提取RNA,逆转录PCR扩增CDK2 cDNA'PCR产物进行TA克隆和DNA序列分析;阳性TA克隆CDK2片段亚克隆入PET28a+载体,IPTG诱导表达人CDK2.结果逆转录PCR扩增出约900 bp的DNA片段,TA克隆和DNA序列分析显示重组片段是人CDK2基因序列,全长897bp;CDK2 cDNA亚克隆入PET28a+载体NcoI和XhoI位点之间;IPTG诱导出约34 kD的蛋白.结论从人胃癌组织中成功地扩