相对定量法检测nestin-GFP转基因小鼠外源基因整合拷贝数

• 作 者: 李振林 郑文宏 贾俊双 安靓
• 机 构: 南方医科大学组织学与胚胎学教研室,南方医科大学肿瘤研究所教育部和广东省共建重大疾病转录组与蛋白组学重点实验室
• 出 处: 山西医科大学学报
• 发表日期: 2013年1期
• 关键词: 定量PCR 外源基因 拷贝数 quantitative real-time PCR exogenous gene copies

目的计算出转基因小鼠nestin-GFP的外源基因整合拷贝数,为研究该模型中外源基因遗传及表达的稳定性打下基础。方法用荧光定量PCR的方法对F0代的2只小鼠基因组做检测。先根据已知拷贝数的GFP（green fluorescent protein）和GAPDH来制作标准曲线和方程,然后计算出基因组中二者所含拷贝数的比例来计算外源基因的拷贝数。结果 2只F0的外源基因拷贝数分别是3和4。结论 nestin-GFP转基因小鼠的外源基因整合拷贝数分别是3和4。