马铃薯无机焦磷酸酶基因cDNA克隆及其反义植物表达载体构建

• 作 者: 刘海英 李有忠 柳娜 司怀军 王蒂
• 机 构: 甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室,甘肃农业大学生命科学技术学院
• 出 处: 分子植物育种
• 发表日期: 2008年1期
• 关键词: 马铃薯 无机焦磷酸酶基因 cDNA克隆 反义植物表达载体

以马铃薯栽培品种大西洋（Atlantic）试管苗叶片为材料，用Trizol试剂提取总RNA，通过RT-PCR方法获得马铃薯PPase基因的cDNA片段，将该片段反向连接到克隆载体pBluescript SK^＋，酶切鉴定后进行基因测序，所得PPase基因片断为673bp，编码211个氨基酸，与已克隆的PPase基因同源性达到97．62％。将该PPase基因反向插入到表达载体pBI121、pBIC和pBIrd中，分别构建了组成型启动子CaMV 35S、块茎特异表达启动子CIPP和低温诱导表达启动子rd29A