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用纯化的重组蛋白抗原作为ELISA包被抗原，通过对抗原包被浓度、血清稀释倍数、酶标二抗稀释倍数、抗原和血清反应时间、血清和酶标二抗反应时间、显色剂作用时间和中止液滴加量的优化，建立了检测胸膜肺炎放线杆菌抗体的间接ELISA方法。特异性实验证明该ELISA方法特异性较强。将建立的ELISA方法与IDEXX公司的标准试剂盒进行了比较，二者的符合率较高，说明建立的ELISA方法比较敏感，为ELISA检测方法的商品化奠定了基础。