阴道毛滴虫RRas基因的cDNA克隆和原核表达

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目的克隆和表达阴道毛滴虫RRas(TvRRas)基因,以便进一步探讨其组织定位及功能。方法应用PCR方法从构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增TvRRas基因片段,克隆至pGEM-T载体。经PCR、酶切和测序鉴定后亚克隆至原核表达载体pET-41a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍-硝基三乙酸(Ni—NTA)柱纯化表达产物后用SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS.PAGE)进行分析鉴定。结果从阴道毛滴虫cDNA表达文库中扩增的TvRRas基因片段
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