【摘 要】
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目的克隆HLA-E cDNA,并使其在HLAⅠ类阴性的靶细胞LcL721.221细胞上获得稳定表达.方法用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞扩增出HLA-E cDNA,并通过内核糖体进入位点(IRES)将目的
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所
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目的克隆HLA-E cDNA,并使其在HLAⅠ类阴性的靶细胞LcL721.221细胞上获得稳定表达.方法用RT-PCR方法从人外周血淋巴细胞扩增出HLA-E cDNA,并通过内核糖体进入位点(IRES)将目的基因亚克隆于已经载有HLA-A2的逆转录病毒表达载体pGCEN上,构建成HLA-A2/E多顺反子表达载体(pG/A2E),采用感染的方法将重组质粒转入LcL721.221细胞,最后经G418筛选及有限稀释,利用抗HLA-E特异的单克隆抗体3D12进行FACS检测,以观察HLA-E分子在靶细胞表面的表达
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