多杀性巴氏杆菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

• 作 者: 许腾林 邢桂玲 刘家森 刘大飞 李志杰 姜骞 康洪涛 田进
• 机 构: 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,东北农业大学动物科技学院
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2018年8期
• 关键词: 多杀性巴氏杆菌 TAQMAN探针 荧光定量PCR Pasteurella multocida TaqMan probe real-time PCR
• 基金项目: 国家重点研发计划（2016YFD0500800）

为建立一种多杀性巴氏杆菌（Pm）快速敏感的检测方法,本实验根据Pm70株kmt1基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针,建立了该菌的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并优化了检测反应条件。本实验建立的荧光定量PCR方法可以特异性检测Pm,而对鸭疫里默氏杆菌、支气管败血波氏杆菌等菌株检测结果均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。该方法对C48-1株标准品的检测灵敏度为1.75×10^1拷贝/μL,优于常规PCR检测方法（1.75×10^3拷贝/μL） 100倍;组内和组间重复性试验