【摘 要】
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目的 探讨Shh/Twist1对低氧诱导的大鼠肺动脉内皮细胞间质转化及血管重构的影响及机制.方法 将原代分离的大鼠肺动脉内皮细胞分为正常对照组(不予低氧处理)和低氧诱导的肺动脉高压(PAH)细胞模型(3％O2低氧处理3 d),PAH细胞模型又分为模型组、Shh抑制组(造模前采用Shh抑制剂预处理细胞)及siRNA-Twist1组(造模前采用siRNA-Twist1预处理细胞);于3％O2培养细胞3 d时,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,小管形成实验检测细胞的成管能力,Real-time PCR法检测细胞的
【机 构】
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中国人民解放军北部战区总医院 呼吸内科, 辽宁 沈阳 110016
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目的 探讨Shh/Twist1对低氧诱导的大鼠肺动脉内皮细胞间质转化及血管重构的影响及机制.方法 将原代分离的大鼠肺动脉内皮细胞分为正常对照组(不予低氧处理)和低氧诱导的肺动脉高压(PAH)细胞模型(3％O2低氧处理3 d),PAH细胞模型又分为模型组、Shh抑制组(造模前采用Shh抑制剂预处理细胞)及siRNA-Twist1组(造模前采用siRNA-Twist1预处理细胞);于3％O2培养细胞3 d时,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,小管形成实验检测细胞的成管能力,Real-time PCR法检测细胞的CD31、vWF、α-SMA mRNA的表达,Western blot法检测细胞的Shh、Twist1、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白的表达.结果 与模型组比较,Shh抑制组和siRNA-Twist1组的迁移和成管能力均降低,差异有统计学意义(P<0.05);Re-al-time PCR及Western blot结果显示,与模型组比较,Shh抑制组和siRNA-Twist1组 α-SMA mRNA及VEGF、MMP2蛋白的表达水平降低,CD31、vWF mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 抑制Shh/Twist1表达能显著降低大鼠肺动脉内皮细胞的内皮间质转化及血管重构能力.
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