【摘 要】
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实时荧光定量PCR(qPCR)是检测食源性病毒的常用方法,其高度的灵敏性导致检测过程中容易产生假阳性结果.基因序列比对法是比利时根特大学食品微生物与食品保藏实验室新近建立
【机 构】
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中国海洋大学食品科学与工程学院食品科学与人类健康实验室 山东青岛 266003根特大学生物工程学院食品安全与食品质量系食品微生物与食品保藏实验室 比利时根特 9000;山东出入境检验检疫局技术中心动物
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实时荧光定量PCR(qPCR)是检测食源性病毒的常用方法,其高度的灵敏性导致检测过程中容易产生假阳性结果.基因序列比对法是比利时根特大学食品微生物与食品保藏实验室新近建立的验证qPCR阳性结果真伪的一种方法.本研究以检测贝类诺如病毒GⅡ.4(NoV GⅡ.4)为例,采用基因序列比对法验证qPCR阳性结果的真伪.在qPCR检测时添加102copies/mL的NoV GⅡ.4质粒作为标准阳性对照,旨在排除由于qPCR的高灵敏性而产生的假阳性结果.研究结果表明,在8份NoV阳性的贝类样品中,2份为NoV GⅡ.4真阳性,2份可能为NoV GⅡ.4的变异株,1份为受到质粒污染的假阳性,其余3份为引物二聚体所致假阳性.基因序列比对法作为一种验证qPCR阳性结果真伪的高效、可行的方法,值得推广.
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