细胞内p53蛋白LC-MS/MS定量方法及其应用

• 作 者: 李盈淳 汤志远 吴梦秋 王广基 郝海平
• 机 构: 中国药科大学药物代谢动力学重点实验室
• 出 处: 中国药科大学学报
• 发表日期: 2012年6期
• 关键词: p53 LC-MS MS 放线菌素D 定量 p53 LC-MS/MS actinomycin D quantification

建立细胞样品中p53蛋白的LC-MS/MS定量方法,应用该定量方法测定放线菌素D作用下细胞中p53表达量的变化。采用免疫沉淀法提取细胞样品中的p53蛋白,对提取后的样品进行酶解,基于肽图分析选择特异性肽段VEY-LDDR（m/z 455.22＋-681.21＋）作为定量肽段,设计合成肽段VEYIEDR（m/z 462.12＋-695.21＋）作为内标肽段,建立该肽段的LC-MS/MS定量方法,通过该肽段表征p53蛋白的量;应用该质谱定量方法对放线菌素D给药后的HCT116细胞中的p53蛋白的表达量进行测定