【摘 要】
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建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准
【机 构】
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中南大学药学院,军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京蛋白质组研究中心、蛋白质组学国家重点实验室、国家蛋白质科学中心(北京),中山大学肿瘤防治中心,北京正旦国际科技有限责任公司,湖南金健药业有限责任
【基金项目】
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863项目(2012AA020205),国家科技部重大仪器专项(2012YQ18011710)
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建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件。加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12 h,偶联比在4∶1~12∶1之间,偶联率在9%~20%之
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