【摘 要】
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目的 探究虾青素对蓝光诱导的小鼠视锥细胞(661W)氧化损伤的保护作用.方法 将661W细胞分成3组:正常组、蓝光组、虾青素干预组.虾青素干预组细胞予以15μmol·L-1虾青素溶液预处理24 h,其余2组不干预;24 h后,将虾青素干预组与蓝光组的细胞暴露于波长为450 nm的短波蓝光中6h,正常组细胞常规培养;12h后收集细胞,用CCK-8检测试剂盒筛选虾青素最佳给药浓度,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS的生成,通过实时荧光PCR和细胞免疫荧光
【机 构】
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福建医科大学医学技术与工程学院眼视光学系,福州350004
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目的 探究虾青素对蓝光诱导的小鼠视锥细胞(661W)氧化损伤的保护作用.方法 将661W细胞分成3组:正常组、蓝光组、虾青素干预组.虾青素干预组细胞予以15μmol·L-1虾青素溶液预处理24 h,其余2组不干预;24 h后,将虾青素干预组与蓝光组的细胞暴露于波长为450 nm的短波蓝光中6h,正常组细胞常规培养;12h后收集细胞,用CCK-8检测试剂盒筛选虾青素最佳给药浓度,活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS的生成,通过实时荧光PCR和细胞免疫荧光法测定各组大鼠视网膜组织中核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2)和血红素氧合酶l (heme oxygenase-1,HO-1)的相对表达量.结果 CCK-8法检测发现虾青素最佳给药浓度为15 μmol·L-1;与正常组相比,蓝光照射后视锥细胞内ROS水平升高(P＜0.01),氧化应激的增强导致细胞增殖活性明显减弱,Nrf2和HO-1 mRNA表达水平显著升高,Nrf2蛋白表达水平降低,HO-1蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01);与蓝光组相比,虾青素的预处理使得虾青素干预组细胞内ROS含量明显减少(P＜0.01,细胞增殖活性提高,Nrf2和HO-1 mRNA表达水平降低(P＜0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高(P＜0.05).结论 虾青素可抑制短波蓝光所诱导的细胞氧化应激损伤以及应激性的Nrf2/HO-1通路激活,维持Nrf2/HO-1通路稳态,有望为蓝光导致的视网膜损伤提供新的保护策略.
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