新孢子虫cDNAT7噬菌体展示文库的构建及筛选

• 作 者: 王铭 高洋 程子英 郑君 贾洪林 宋铭忻
• 机 构: 东北农业大学动物医学学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室一美国密西根州立大学天然免疫联合实验室,延边大学农学院动物医学系,吉林农业大学动物科学技术学院
• 出 处: 中国预防兽医学报
• 发表日期: 2014年4期
• 关键词: 新孢子虫病 T7噬菌体展示文库 抗原候选基因 Neospora caninum phage display cDNA library candidate a
• 基金项目: 基金项目：哈尔滨市科技创新人才研究专项基金（2013RFLYJ024）

为筛选犬新孢子虫相关抗原，本研究利用T7噬菌体展示技术构建犬新孢子虫cDNA文库，并利用阳性血清筛选新型犬新孢子虫抗原蛋白。所构建的新孢子虫cDNA文库的原始文库重组克隆数为6×10^6pfu，扩增后文库滴度为3×10^10pfu／mL。分别提取犬新孢子虫免疫小鼠血清和感染小鼠血清中的IgG，并利用纯化的IgG对构建的新孢子虫cDNA文库进行筛选。经过3轮筛选，共鉴定出14个不同的犬新孢子虫基因插入片段。经过分析，有7个基因编码的是功能未知蛋白，其它为蛋白质合成相关蛋白、核苷酸代谢相关