【摘 要】
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克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p-nitrophenylphosphatase, pNPPase)基因,将其编码区cDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coli M15中经IPTG
【基金项目】
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国家自然科学基金，上海市青年科技启明星计划
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克隆到脂肪芽孢杆菌Bacillus stearothermophilus中的对硝基酚磷酸酶(p-nitrophenylphosphatase, pNPPase)基因,将其编码区cDNA连接到pQE30表达载体中,在E.coli M15中经IPTG诱导得到高效表达. 用Ni-NTA Superflow层析柱对表达产物进行了分离纯化,初步测定了pNPPase的酶学性质. 发现它的反应最适pH是10.0,最适反应温度是55 ℃,热稳定性Tm值为52 ℃,Mg2+、Mn2+和Co2+对pNPPase的活性有一定的
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