子宫内膜癌细胞和组织中胰岛素受体亚型的表达及作用的初步探讨

• 作 者: 张果 李小平 王建六 魏丽惠
• 机 构: 100044北京大学人民医院妇科,100044北京大学人民医院妇科,100044北京大学人民医院妇科,100044北京大学人民医院妇科
• 出 处: 中华妇产科杂志
• 发表日期: 2012年47期
• 关键词: 子宫内膜肿瘤 受体 胰岛素 高胰岛素血症

目的 研究胰岛素受体(IR)亚型(包括IR-A和IR-B)在子宫内膜癌细胞及组织中的表达情况,并初步探讨IR-A在子宫内膜癌细胞增殖中的作用.方法 选取4种不同子宫内膜癌细胞系HEC-1-A、Ishikawa、RL95-2、KLE细胞,以乳腺癌细胞系MCF-7细胞和肝癌细胞系Hep-G2细胞为阳性对照;收集2007年11月-2009年7月间北京大学人民医院收治的42例子宫内膜癌患者的癌组织标本,以同期收治的15例因卵巢肿瘤行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织标本作为对照.(1)采用逆转录(RT)-PCR技术检测4种不同子宫内膜癌细胞及组织中IR亚型的表达形式,应用实时定量PCR技术检测其IR及IR-A mRNA的表达水平,采用Spearman等级相关分析方法对影响子宫内膜癌组织中IR及IR-A mRNA表达的临床病理因素进行分析.(2)构建稳定过度表达IR-A基因的RL95-2细胞系RL95-2(IR-A)细胞,采用非放射性细胞增殖检测法—MTS法检测4种不同子宫内膜癌细胞和RL95-2(IR-A)细胞培养1～7d的增殖情况.结果(1)RT-PCR技术检测显示,在子宫内膜癌HEC-1-A、Ishikawa、RL95-2、KLE细胞及组织中,IR均以IR-A和IR-B两种亚型共同表达.实时定量PCR技术检测显示,在子宫内膜癌细胞中,IR mRNA的表达水平以RL95-2细胞最高,其次为Ishikawa、KLE和HEC-1-A细胞,其IR mRNA的表达水平分别为(26.54±1.82)×10-4、(15.44±3.29)×10-4、(10.14 ±0.10)×10-4和(2.63 ±0.23)×10-4,4者比较,差异有统计学意义(P＜0.01);IR-A mRNA的表达水平以Ishikawa细胞最高,其次为KLE、RL95-2和HEC-1-A细胞,其IR-A mRNA的表达水平分别为(12.07 ±3.31)×10-4、(4.68 ±0.63)×10-4、(3.03±0.22)×10-4和(1.46±0.03)×10-4,4者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).在子宫内膜癌组织中,IR及IR-A mRNA的表达水平分别为0.017±0.013、0.011±0.010,分别与对照组(分别为0.015±0.014、0.010±0.012)比较,差异均无统计学意义(P=0.662,P=0.780).子宫内膜癌组织中IR及IR-A mRNA的表达水平与手术病理分期、病理分级、肌层浸润、淋巴管癌栓、淋巴结转移及ER、PR、PTEN 基因的表达均无明显相关性(P均＞0.05);IR-A mRNA的表达水平与有无2型糖尿病明显相关(P=0.031),但IR mRNA的表达水平与有无2型糖尿病无明显相关性(P =0.438).(2)本研究成功构建过度表达IR-A基因的RL95-2细胞系RL95-2(IR-A)细胞.MTS法检测显示,分别培养1～7d后,4种不同子宫内膜癌细胞中以Ishikawa细胞的增殖速度最快,其次依次为HFC-1-A、KLE和RL95-2细胞,4种细胞各时间点分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);稳定转染后的RL95-2(IR-A)细胞的增殖速度明显快于未转染的RL95-2细胞,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 子宫内膜癌细胞及组织中IR均以IR-A和IR-B两种亚型共同表达,过度表达IR-A基因可促进子宫内膜癌细胞的增殖。