蓝氏贾第鞭毛虫基因快速标记载体的构建

• 作 者: 巨红妹 王乙惠 张霞 王云华 李雅杰
• 机 构: 大连大学医学院
• 出 处: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 发表日期: 2012年3期
• 关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫 HA标签 快速标记载体 Giardia lamblia HA tag Rapid tagging vector

目的构建可快速标记蓝氏贾第鞭毛虫（简称贾第虫）基因的重组载体。方法采用重叠PCR法将新霉素（Neo）基因置于gdh启动子调控下,并插入pGEM-5zf载体,获得带有Neo筛选标记的重组载体pGL gdh-Neo;并将基因合成所得3′末端带有3×HA标签的多克隆位点区克隆至重组载体pGL gdh-Neo,构建可快速标记贾第虫基因的重组载体pGLMCS-3HA-gdh-Neo。以该载体标记贾第虫H2A基因验证其可用性。PCR扩增组蛋白H2A基因序列,用EcoRⅠ和SpeⅠ双酶切后克隆至重组载体pGL