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目的
探讨外泌体对人神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)缺氧再灌注损伤的影响。
方法构建人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)缺氧再灌注损伤(HUVEC I/R)模型，从中提取外泌体并予以鉴定。构建SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤(SH-SY5Y I/R)模型并分为2组，其中外泌体组于再灌注同时予以外泌体刺激，对照组于再灌注同时予以无外泌体血清培养基培养。采用CCK8法检测2组细胞培养24 h、48 h、72 h时细胞活力，采用Hochest33258染色检测细胞凋亡情况，采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况及细胞周期，采用划痕实验、Transwell侵袭实验分别检测细胞迁移能力和侵袭能力，采用RT-qPCR、Western blotting检测细胞中Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白表达。
结果与对照组比较，外泌体组细胞培养48 h、72 h时细胞活力明显提高(48 h：0.70±0.05 vs 0.94±0.08；72 h：0.83±0.05 vs 1.02±0.06)，G0/G1期细胞比例明显降低(71.26%±5.24% vs 66.87%±4.23%)，S期细胞比例明显增高(14.39%±4.11% vs 20.54%±3.46%)，相对划痕损伤面积明显减少(0.61±0.07 vs 0.52±0.10)，穿膜细胞数量明显增多(44.00±6.56 vs 70.67±6.11)，细胞中Bax、Caspase-3 mRNA表达水平明显降低、Bcl-2 mRNA表达水平明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论HUVEC I/R模型来源外泌体可在SH-SY5Y细胞缺氧再灌注损伤后发挥神经保护作用。