白血病干细胞的新型标志蛋白IL1RAP杂交瘤细胞的制备及其分泌单克隆抗体的检测

• 作 者: 赵恺 尹玲玲 赵冬梅 吴庆运 陈翀 潘彬 曾令宇 姚瑶 徐开
• 机 构: 徐州医学院移植免疫实验室,徐州医学院附属医院血液科
• 出 处: 中国实验血液学杂志
• 发表日期: 2013年6期
• 关键词: IL1RAP杂交瘤 单克隆抗体 白血病干细胞 IL1RAP hybridoma cell monoclonal antibody leukemia stem
• 基金项目: 国家自然科学基金（编号81200376,81270637）,中国博士后科学基金资助项目（编号2012M510141）,江苏省”六大人才高峰”资助（编号2012-WSN-082）,徐州医学院院长专项人才基金（编号2012KJZl3）

本研究旨在制备针对白血病干细胞表面标志蛋白IL1RAP（IL-1receptoraccessoryprotein）的特异性单克隆抗体并对其进行鉴定。用重组人IL1RAP作为抗原免疫BALB／c小鼠，通过常规杂交瘤技术将免疫后的小鼠脾细胞与SP2／0细胞经PEG融合，筛选阳性杂交瘤细胞株。分别应用EusA和Westernblot法对杂交瘤细胞上清中分泌抗体进行抗体类型、滴度和敏感性检测。分离人外周单个核细胞，检测所得抗体对细胞内源性抗原的特异性。结果表明，获得了8株可稳定分泌IL1RAP单克隆抗体的杂交瘤细