鼠抗人纤维蛋白单链抗体-尿激酶杂合基因的构建及其在中国仓鼠卵巢细胞中的表达

• 作 者: 舒东 俞炜源 赵志玲 徐兵 罗深秋
• 机 构: 第一军医大学,军事医学科学院生物工程研究所!北京100071
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 1999年2期
• 关键词: 单链抗体 低分子量尿激酶 融合蛋白 CHO-dhfr-细胞 ScFv ScuPA32K fusion protein CHOdhfr
• 基金项目: 国家科技部 863计划资助课题

采用 DNA重组技术构建了表达鼠抗人纤维蛋白单链抗体与低分子量尿激酶融合基因的真核表达载体。通过磷酸钙共沉淀法 ,将该表达载体转染到中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株 ( CHO- dhfr-)中 ,利用选择培养基筛选出稳定表达的细胞株 ,溶解圈法测定融合蛋白的表达水平为每 1 0 6细胞每天 5 8IU。该融合蛋白保留了与纤维蛋白的结合活性和溶解纤维蛋白的溶纤活性。SDS- PAGE,Western印迹法分析证明融合蛋白的相对分子质量约为 70× 1 0 3