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目的探讨二次膜分离提取藏牦牛血凝血酶的工艺。方法根据藏牦牛血凝血酶原及其凝血酶的分子量，进行二次膜分离技术提取藏牦牛血凝血酶。结果采用二次膜分离技术提取藏牦牛血凝血酶，其比活力与活力回收分别比有机溶剂沉淀法提高了76．72U／mg蛋白质和35．0％；其比活力比一次膜分离法提高了41．14U／mg蛋白质。结论工艺可靠，方法可行，适宜于中小企业的生产。