PCR-RFLP方法检测CCR5基因启动子区59029G／A多态性的实验研究

• 作 者: 李会芳 刘华 宋滇平 王玉明
• 机 构: 昆明医学院第一附属医院糖尿病科,昆明医学院第一附属医院检验科
• 出 处: 昆明医学院学报
• 发表日期: 2005年4期
• 关键词: 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 CCR5基因 实验条件 Polymerase chain reaction Restriction fragment le

目的:确定PCR-RFLP技术检测CCR5基因启动子区59029G/A多态性的最适实验条件.方法:对主要影响因素设系列浓度梯度分别进行PCR后观察电泳结果.结果:最适变性温度为94℃;最适退火温度为60℃;最适引物浓度为0.4 μ.mol/L;最适Mg2+浓度为1.5 mmol/L;最适dNTP浓度为0.20 mol/L;以1.0U为最适Taq酶量.结论:酶切体系为20uL体系中加5uL产物用4 U的酶消化,为后续研究奠定了实验基础.