AKTIP基因真核表达载体的构建及其在GES-1细胞中的表达

• 作 者: 利荣乔 黄俏佳
• 机 构: 南京军区福州总医院分子医学研究中心
• 出 处: 第四军医大学学报
• 发表日期: 2008年23期
• 关键词: 蛋白激酶B相互作用蛋白 逆转录-PCR 基因克隆 基因转染 蛋白质印迹技术 AKTIP RT-PCR gene cloning gene transfecti
• 基金项目: 南京军区福州总医院留学归国人员专项基金（2004037）

目的：构建人蛋白激酶B相互作用蛋白（AKTIP）基因编码区序列（cDNA）的真核表达载体，观察其在GES-1细胞中的表达．方法：从健康人外周血中提取总RNA，应用RT—PCR方法扩增AKTIPcDNA的全长序列后克隆入pcDNA3．1／myc—His（-）A质粒中，经酶切鉴定及DNA测序证实后，应用脂质体将AKTIP基因转染人人胃黏膜细胞株GES-1细胞中，通过WesternBlot检测其在GES-1细胞中的表达情况．结果：重组载体经酶切鉴定和测序证实目的基因正确无误，WesternBlot结果显示AKT