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目的:进行外源性基因真核表达的系统构建。方法:以肾组织mRNA为模板进行逆转录PCR扩增人表皮细胞生长因子(hEGF)信号肽基因;将扩增的特异性DNA条带克隆于pBK-CMV质粒中进行序列测定;再将已扩增的hEGF基因克隆于测序正确的pBK-信号肽双链中,挑选白色菌落进行PCR及酶切鉴定。结果:(1)测序结果表明经PCR扩增的特异性DNA条带的基因序列与hEGF信号肽基因一致;(2)经PCR及酶切鉴定获得了序列正确的pBK-信号肽-EGF真核表达质粒。结论:本法可构建hEGF基因真核表达质粒。