【摘 要】
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猪流行性腹泻病毒（PEDV）是引发猪群腹泻的主要病原之一，给我国生猪养殖业造成了重大的经济损失。为建立IgA-ELISA抗体检测方法，本研究采用变异PEDV真核表达的S-N融合蛋白作为包被抗原，通过系列反应条件优化，建立了PEDV的IgA-ELISA抗体检测方法。该方法的最佳反应条件为包被抗原质量浓度2 mg/L,用5%BSA于37℃封闭2 h;将待检血清1∶50稀释于37℃作用1 h,加1∶20
【机 构】
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心
【基金项目】
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公益类科研院所专项资助项目（2021R10260016）； 福建省重大专项专题资助项目（2021NZ029023）； 5511协同创新工程资助项目（XTCXGC2021008）； 福建省星火科技计划资助项目（2020S0002）；
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猪流行性腹泻病毒（PEDV）是引发猪群腹泻的主要病原之一，给我国生猪养殖业造成了重大的经济损失。为建立IgA-ELISA抗体检测方法，本研究采用变异PEDV真核表达的S-N融合蛋白作为包被抗原，通过系列反应条件优化，建立了PEDV的IgA-ELISA抗体检测方法。该方法的最佳反应条件为包被抗原质量浓度2 mg/L,用5%BSA于37℃封闭2 h;将待检血清1∶50稀释于37℃作用1 h,加1∶20 000稀释酶标二抗于37℃作用30 min, TMB显色10 min;以D450 nm ≥0.326判定为阳性，当D450 nm ≤0.277判定为阴性，介于两者判定为可疑。检测猪瘟病毒（CSFV）、伪狂犬病病毒（PRV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、轮状病毒（PoRV）标准阳性血清抗体均为阴性，且重复性变异系数均低于10%。通过对我国福建地区304份样品（血清179份和乳汁125份）进行检测，并与商品试剂盒进行参照对比，总符合率达到93.2%以上，表明该试剂盒检测方法具有较高的特异性、敏感性和重复性，可用于对PEDV的IgA抗体检测。
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