藏羊源细粒棘球蚴抗原B8/2基因的克隆表达和免疫学鉴定

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snowtea1987
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目的 克隆、表达青海省藏羊源细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)抗原B8/2(EgAgB8/2)基因,并进行免疫学鉴定.方法 用RT-PCR扩增EgAgB8/2基因cDNA,构建原核表达载体pET-EgAgB8/2,转化至大肠埃希菌BL21 (DE3)中诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)对诱导表达后的蛋白进行鉴定.结果 克隆的EgAgB8/2基因长335 bp,序列分析表明与已报道的EgAgB8/2 cDNA序列的同源性为98%~ 100%,原核表达载体pET-EgAgB8/2构建正确.诱导表达后,通过SDS-PAGE检测,上清中有大量目的蛋白表达.纯化的蛋白经Western blotting鉴定为目的蛋白.结论 成功克隆了青海省藏羊源EgAgB8/2基因,构建了原核表达载体,诱导表达后的蛋白为目的蛋白.
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