利用重叠PCR法克隆里氏木霉β-葡萄糖苷酶基因cel1

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在利用里氏木霉降解纤维素为葡萄糖继而发酵生产液体燃料和大宗化学品的工业生产过程中,降解纤维素为葡萄糖是关键的一步.β-葡萄糖苷酶在调控纤维素酶的活性及其表达时起到至关重要的双重作用.为了研究β-葡萄糖苷酶Cel1a在里氏木霉RutC-30中对纤维素酶诱导表达及其酶活性的影响,以里氏木霉的基因组DNA为模板,设计扩增看家基因(β-actin)的启动子(Pact)和cel1a的引物,分别进行Pact、cel1a的PCR扩增,然后利用重叠PCR将Pact、cel1a连成1个片段Pact-cel1a,再通过酶切成
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