【摘 要】
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目的建立和评价一个新的多重和巢式PCR-反向线点杂交试验(RLB)检测泌尿生殖道沙眼衣原体及其分型方法.方法该试验设计了3对引物分别针对CT外膜蛋白(omp1)基因VD2区和质粒进行
【机 构】
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深圳市慢性病防治院,Center for Infectious Disease and Microbiology
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目的建立和评价一个新的多重和巢式PCR-反向线点杂交试验(RLB)检测泌尿生殖道沙眼衣原体及其分型方法.方法该试验设计了3对引物分别针对CT外膜蛋白(omp1)基因VD2区和质粒进行扩增,用CT15种血清型(A、B/Ba、C、D/Da、E、F、G/Ga、H、I/Ia、J、Ja、K、L1、L2 和L3)探针与扩增后的产物杂交.经COBAS Amplicor检测的355份标本,其中277份尿液,2份男性直肠拭子和78份女性宫颈试子,进行PCR-RLB检测CT并分型.结果 192份COBAS Amplicor阳性标本中175份PCR-RLB阳性,其中93.1%(163/175)的CT感染可被正确分型,其单一型感染分型结果与DNA测序结果一致.163份COBAS Amplicor阴性标本中6份巢式PCR-RLB阳性.85.3%(139/163)为单一型CT感染,最常见的CT是E(38.6%)F (28.5%)和D(18.2%).14.7%(24/163)为CT混合感染,混合感染以H和K为主.结论 PCR-RLB检测CT是一种简便、快速、特异和敏感的方法,并准确的进行CT分型,为CT感染的临床诊断和分子流行病学研究提供了一种可靠的方法.
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