【摘 要】
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目的利用重叠延伸聚合酶链反应（SOE-PCR）快速构建乙型肝炎病毒（HBV）阿德福韦酯耐药株（RT A181T）感染性克隆,观察重组质粒在Huh7细胞中的表达,建立HBV阿德福韦酯耐药株（RT A181T）的体
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目的利用重叠延伸聚合酶链反应（SOE-PCR）快速构建乙型肝炎病毒（HBV）阿德福韦酯耐药株（RT A181T）感染性克隆,观察重组质粒在Huh7细胞中的表达,建立HBV阿德福韦酯耐药株（RT A181T）的体外研究细胞模型。方法设计保守引物,从慢性乙型肝炎阿德福韦酯耐药患者血清中扩增全长HBV基因组,利用SOE-PCR技术构建1.3倍基因组长度的感染性克隆质粒pHBV1.3,转染肝癌细胞系Huh7,采Western Blot、Real-time PCR检测感染性克隆复制以及表达情况,同时用抗病毒药物拉米
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