中华绒螯蟹和罗氏沼虾cyclin B蛋白的原核表达、抗体制备及其鉴定

• 作 者: 冯海洋 邱高峰
• 机 构: 上海海洋大学农业部水产种质资源与利用重点开放实验室,上海高校水产养殖学E-研究院
• 出 处: 中国水产科学
• 发表日期: 2011年4期
• 关键词: 中华绒螯蟹 罗氏沼虾 cyclinB多克隆抗体 原核表达 卵母细胞成熟 cyclin B prokaryotic expression polyclonal

从中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）和罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii）卵巢cDNA中克隆了cyclin B基因的开放阅读框,分别连接到pGEX-2T和pET-32a表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达重组蛋白GST-EsCB和Trx-MrCB。通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组蛋白的最佳表达条件分别为：0.1 mmol/L IPTG、37℃、4 h和0.1 mmol/L IPTG、30℃、6 h。重组蛋白主要以包涵体形