高纯度凝血酶的分离纯化

• 作 者: 黄宏宝 郑登忠 陈秀兰 赵晶 章丽丽 黄发灿
• 机 构: 350122 福州，福建中医药大学药学院,365004 福州，福建华灿制药有限公司研发中心,250100 济南，山东大学生命科学院,350122 福州，福建中医药大学药学院,365004 福州，福建华
• 出 处: 国际生物制品学杂志
• 发表日期: 2017年40期
• 关键词: 凝血酶 色谱法 离子交换 工艺学 制药

目的

利用猪血浆制备高纯度凝血酶。

方法

使用DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析分离猪血浆获得凝血酶原后，用CaCl₂激活凝血酶原生成凝血酶。获得的凝血酶粗制品经2次SP-Sepharose FF阳离子交换层析获得高纯度凝血酶。

结果

2次层析后的凝血酶的比活为2 546 IU/mg，是凝血酶粗制品的8倍，得率为54%。快速蛋白液相层析检测表明，2次层析后的凝血酶纯度达89%。

结论

猪血浆通过1次DEAE-Sepharose FF和2次SP-Sepharose FF离子交换层析可得到高纯度凝血酶。