RNA干扰对大鼠血管内皮细胞血管紧张素转换酶表达的抑制作用

来源 :中国心血管杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qianlingyuyi
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目的用RNA干扰技术选择性下调大鼠血管内皮细胞(ECs)上血管紧张素转换酶(ACE)的表达。方法构建携带ACE基因特异短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pACE—shRNA,与脂质体转染剂制备成不同比例的复合物,转染原代培养的大鼠主动脉ECs,在荧光显微镜下检测转染效率,用四甲基氮唑盐比色法检测细胞存活率,选择出质粒与转染剂的最佳配比。然后以最佳配比复合物转染ECs,分别于转染前及转染后24、48、72h通过半定量RT—PCR和Western blot法检测ACE的表达。结果质粒与转染剂的最佳配
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