人NP9基因蛋白重组腺病毒的制备

• 作 者: 刘启才 李晓艳 彭燕 李冰
• 机 构: 广州医学院实验医学研究中心,中山大学附属第一医院肾脏病研究所
• 出 处: 广州医学院学报
• 发表日期: 2005年2期
• 关键词: 复制缺陷型腺病毒 同源重组 NP9基因 基因治疗 replication deficient adenovirus homologous recombinati

目的:制备表达人NP9蛋白的复制缺陷型重组腺病毒.方法:酶切pMD18T-NP9质粒获得NP9基因编码区序列并克隆至穿梭载体构建重组pAdTrack-CMV-NP9载体,线性化后与pAdEasy-1共转化BJ5183,通过同源重组得到重组的pAD-NP9病毒载体.将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒.结果:酶切鉴定得到阳性pAD-NP9重组腺病毒载体,该载体能有效转染HEK293细胞并在细胞内成功包装,转染3d后可以观察到绿色荧光蛋白(GFP)表达并逐渐增多、增强.结论:成功构建了NP9