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溶菌酶能破坏和消除侵入体内的病原或异物，是甲壳动物免疫系统中一个重要的效应分子。本文根据克隆得到的三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）G型溶菌酶基因（Lysozyme）全长序列，设计带有酶切位点的特异性引物，经RT-PCR扩增得到溶菌酶基因（PtLys）的开放性阅读框，将其克隆至载体pMD18-T，并测序。用限制性内切酶BamHI和XhoJ双酶切取目的基因，并与表达载体pET-28a（＋）连接，构建了PtLys基因的原核表达载体p28a-PtLys，在大肠杆菌（ECO—li）BL