【摘 要】
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目的: 研究大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析.方法: 无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞.用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4+ CD25+ T
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院肝脏移植中心
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目的: 研究大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析.方法: 无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞.用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4+ CD25+ T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增.采用混合淋巴细胞反应研究CD4+ CD25+ Tr细胞对CD4+ CD25- T细胞的免疫抑制作用.用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异.结果: MACS分离的CD4+ CD25+ T细胞的纯度达86%～93%.该细胞与CD4+ CD25- T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因.体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10.结论: 采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4+ CD25+ T调节细胞,该细胞对CD4+ CD25- T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因.
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