【摘 要】
：
研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响, 进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法. 设计合成针对per 1的脱氧核酶DRz164, DRz256, 并构建pcDNA3-per1164:256体
论文部分内容阅读
研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响, 进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法. 设计合成针对per 1的脱氧核酶DRz164, DRz256, 并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体, 将转录产物和脱氧核酶混合, 在一定反应条件下进行体外切割反应, 地高辛酶联免疫及酶催化显色法检测脱氧核酶的体外切割效率. 将pcDNA3-per1和DRz164或DRz256在脂质体的介导下转染NIH3T3细胞, 通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测脱氧核酶对近日基因表达的影响. 于37℃孵育2 h后, DRz164对底物的剪切百分率为63%, DRz256为50.5%. RT-PCR半定量检测per1 mRNA表达水平明显下降, FCM结果显示细胞内Per1蛋白的合成受到抑制. 脱氧核酶DRz164, DRz256体外具有定点切割近日钟基因per1mRNA组分的活性, 使转染细胞per1 mRNA 和Per1蛋白表达下降.
其他文献
目的: 从噬菌体抗体库中筛选人源性抗IL- 8单链抗体(scFV)。方法: 采用原核表达载体pRSET- IL- 8在大肠杆菌BL21(DE3)中表达IL- 8 His融合蛋白, 并通过亲和层析纯化。以该
目的评价原发性胆管细胞性肝癌外科诊治的效果.方法回顾性分析1996年1月至2001年12月间经手术治疗的42例原发性胆管细胞性肝癌的临床与病理资料.结果 42例患者以上腹痛、黄疸
目的建立多重16S rDNA PCR检测慢性牙周炎(CP)标本中牙龈卟啉单胞菌(Pg)、伴放线杆菌(Aa)和齿垢密螺旋体(Td),了解不同感染情况与CP严重程度的关系.方法将轻、中和重度152例C
目的了解口腔鳞癌术后放疗对患者口腔菌群的影响,为临床防治继发感染提供实验依据.方法32例口腔鳞癌术后患者,于放疗前后分别在照射野的中心区域与对侧黏膜采集唾液标本,进行
采用免疫组织化学法检测survivin、bcl- 2蛋白在8例正常垂体组织及38例垂体腺瘤组织中的表达。结果提示survivin蛋白的表达阳性率与垂体腺瘤组织中的bcl -2蛋白表达密切相关,
目的探讨阻断培养的成人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞产生血管内皮细胞生长因子(vascularendotheliumgrowthfactor,VEGF)后对RPE细胞形态及生长的影响
目的 观察不同抗氧化活性水果汁对老龄大鼠抗氧化功能的干预作用,为进一步研究水果抗氧化抗衰老有效成分提供理论依据。方法 自然衰老Wistar大鼠 30只分为 3组,分别灌胃石
目的观察靶控输注(TCI)不同浓度芬太尼和应激的关系,研究TCI的准确性.方法30例拟在全麻下行腹部手术的病人,随机分为3组,每组10例,Ⅰ组和Ⅱ组芬太尼TCI效应室目标浓度分别设
在20世纪80年以来的行政性分权改革中,大城市的区一级政府在区域经济社会发展中发挥了越来越重要的作用.经济运行机制的转变,行政事权的下放,围绕"五年计划"的制订,形成了市
目的探讨螺旋CT三维(3D)重建技术在牙齿正畸中的临床应用价值。方法41例牙齿正畸的患者行螺旋CT轴面扫描,层厚30mm。采用最大密度投影法(MIP),表面遮盖法(SSD)和多层面重建法